مرحله 1: ظرف پتری را آماده کنید

  1. یک ظرف پتری را انتخاب کنید که برای رشد باکتری ها مناسب است. یک ظرف پتری با کف صاف و درب بهترین است، زیرا امکان مشاهده آسان رشد باکتری را فراهم می کند.
  2. پتری دیش را با اتوکلاو کردن یا قرار دادن آن در معرض نور UV به مدت 30 دقیقه استریل کنید.
  3. اجازه دهید ظرف پتری قبل از استفاده خنک شود.
  4. از یک حلقه استریل برای برداشتن پودر آگار از بطری و اضافه کردن آن به ظرف پتری استفاده کنید.
  5. بر اساس دستورالعمل سازنده، مقدار مناسب پودر آگار را به پتری دیش اضافه کنید.
  6. از پخش کننده استریل برای پخش یکنواخت پودر آگار در پتری دیش استفاده کنید.
  7. قبل از رفتن به مرحله بعدی اجازه دهید پودر آگار کاملا حل شود.

مرحله 2: کشت باکتری را آماده کنید

  1. یک کشت باکتریایی را انتخاب کنید که می‌خواهید در پتری دیش رشد کنید.
  2. از یک حلقه استریل برای برداشتن مقدار کمی از کشت باکتری از یک انبار منجمد و قرار دادن آن در یک لوله استریل استفاده کنید.
  3. یک محیط رشد مناسب (مانند لوریا-برتانی آگار) را به لوله اضافه کنید و خوب مخلوط کنید.
  4. لوله را در یک حمام آب در دمای مناسب برای رشد باکتری (معمولاً حدود 37 درجه سانتیگراد) قرار دهید.
  5. لوله را به مدت 24 تا 48 ساعت جوجه کشی کنید تا باکتری ها رشد کنند.
  6. زمانی که باکتری ها به تراکم مورد نظر رشد کردند، از یک حلقه استریل برای انتقال مقدار کمی از کشت باکتری به ظرف پتری استفاده کنید.

مرحله 3: کشت باکتریایی را به ظرف پتری اضافه کنید

  1. از یک حلقه استریل برای انتقال دقیق کشت باکتری از لوله به پتری دیش استفاده کنید.
  2. کشت باکتری را به طور مساوی روی سطح پودر آگار در پتری دیش پخش کنید.
  3. از پخش کننده استریل استفاده کنید تا به آرامی کشت باکتری را به پودر آگار فشار دهید.
  4. اجازه دهید کشت باکتری در ظرف پتری برای مدت زمان مناسب رشد کند (معمولاً 48-24 ساعت).

مرحله 4: پتری دیش را جوجه کشی کنید

  1. پتری دیش را در انکوباتور در دمای مناسب برای رشد باکتری (معمولاً حدود 37 درجه سانتیگراد) قرار دهید.
  2. پتری دیش را برای مدت زمان مناسب (معمولاً 48-24 ساعت) جوجه کشی کنید.
  3. به طور منظم ظرف پتری را بررسی کنید تا مطمئن شوید که باکتری ها به درستی رشد می کنند.

مرحله 5: رشد باکتری ها را مشاهده و ثبت کنید

  1. از ذره بین یا میکروسکوپ برای مشاهده رشد باکتری در ظرف پتری استفاده کنید.
  2. از ظاهر باکتری ها، از جمله اندازه، شکل و رنگ آنها یادداشت بردارید.
  3. قطر کلنی های باکتری را با استفاده از خط کش یا ابزار اندازه گیری اندازه گیری کنید.
  4. مشاهدات و اندازه گیری های خود را در یک دفترچه یا برگه داده ثبت کنید.

مرحله 6: ظرف پتری و کشت باکتریایی را دور بریزید

  1. زمانی که رشد باکتری به حد مطلوب رسید، پتری دیش و کشت باکتری را با دقت دور بریزید.
  2. پس از دست زدن به ظرف پتری و کشت باکتری، دست های خود را کاملا با آب و صابون بشویید.

نکاتی برای هر مرحله:

  1. برای جلوگیری از آلودگی، همیشه از تجهیزات استریل استفاده کنید.
  2. از پروتکل‌های آزمایشگاهی مناسب هنگام کار با باکتری‌ها برای جلوگیری از خطر عفونت پیروی کنید.
  3. از تکنیک‌های آسپتیک هنگام انتقال کشت‌های باکتریایی برای اطمینان از آلوده نشدن آنها استفاده کنید.
  4. اجازه دهید کشت باکتری برای مدت زمان مناسب رشد کند تا مطمئن شوید که باکتری سالم و تثبیت شده است.
  5. از ذره بین یا میکروسکوپ برای مشاهده باکتری ها از نزدیک و ثبت مشاهدات خود استفاده کنید.
  6. سوابق دقیق آزمایش‌های خود، از جمله تاریخ، زمان و شرایط آزمایش را نگه دارید.
  7. برای جلوگیری از خطر آلودگی، تمام مواد مورد استفاده در آزمایش را به درستی دور بریزید.
  8. بعد از دست زدن به کشت باکتری، دست های خود را کاملا با آب و صابون بشویید.
  9. از روش‌های آسپتیک هنگام دور انداختن پتری دیش و کشت باکتری برای جلوگیری از خطر آلودگی استفاده کنید.
  10. از پروتکل های آزمایشگاهی مناسب هنگام دور انداختن پتری دیش و کشت باکتری برای جلوگیری از خطر عفونت پیروی کنید.

 

موضوعات: بدون موضوع  لینک ثابت


فرم در حال بارگذاری ...